Influence of diets varying in lipid and protein content on the histopathologic variety of murine salivary gland tumors induced by 9, 10-dimethyl-1, 2-benzanthracene (DMBA) / Influencia de dietas de diferente contenido lipídico y proteico sobre variantes histopatológicas de tumores de glándulas salivares murinos inducidos con 9, 10-dimethyl-1, 2-benzathraceno (DMBA)

The purpose of this study was to analyze the influence of diets varying in lipids and proteins on the histopathologic variety of murine salivary tumors induced by DMBA. 117 BALB/c mice were assigned to experiments one (E1: lipids, males) and two (E2: proteins, males and females), E1 comprising Soy oil (SO); Corn oil (CO, control); Fish oil (FO) and Olein (O) groups and E2, soy protein (SP) and casein (C) groups. Tumors were induced by DMBA and the animals were sacrificed at week 13- post-induction. Tumor volume was calculated. Tumor sections were stained with H-E for histopathologic evaluation. No significant association was found between tumor volume and dietary condition (p > 0.05). In E1, FO animals developed mainly carcinomas (C) (58.8%), the sarcomas (S) and carcinosarcomas (CS) being especially of high-grade type (tumors < 600 mm3). In E2, SP animals developed mainly C (55.6%). Although no significantly different (p > 0.05), S and C were more frequent in female and male mice, respectively. In both E1 and E2, the biggest tumors (> 600 mm3) were mainly high-grade S (87.5%-80%). Dietary fat and soy protein appear to influence the tumor histopathology and thus its prognosis.

El objetivo de este estudio fue analizar la influencia de dietas con diferente contenido de lípidos y proteínas sobre la variedad histopatológica de tumores salivares murinos inducidos por DMBA. Se asignaron 117 ratones BALB/c a los experimentos uno (E1: lípidos, machos) y dos (E2: proteínas, machos y hembras). E1 comprendió a los grupos aceite de soja (AS), aceite de maíz (AM, control), aceite de pescado (AP) y oleína (O), en tanto E2 incluyó a los grupos preteína de soja (PS) y caseína (C). Los tumores fueron inducidos por DMBA y los animales fueron sacrificados a la 13ª semana post-inducción. Se calculó el volumen tumoral. Los cortes de tumor fueron coloreados con Hematoxilina-Eosina para su evaluación histopatológica. No se encontró asociación entre volumen tumoral y condición dietaria (p>0.05). En E1, los animales del grupo AP desarrollaron principales carcinomas (C) (58,8%), en tanto que los sarcomas (S) y carcinosarcomas (CS) fueron de alto grado (tumores<600 mm³). En el E2, los animales del grupo PS desarrollaron principalmente C (55.6%). Aunque la diferencia no fue significativa (p>0.05), S y C fueron más frecuentes en ratones hembras y machos, respectivamente. Tanto el E1 com en E2, los tumores más voluminosos (> 600 mm³) fueron principalmente de alto grado (87.5%-80%) Los lípidos y la proteína de soja de la dieta parecen influenciar la histopatología de los tumores y, en consecuencia, su pronóstico.

Early phenotypic and genotypic alterations in submandibular gland oncogenesis in rats

Se evaluaron modificaciones del fenotipo y genotipo en glándulas submandibulares durante el desarrollo temprano de la tumorogénesis. Glándulas submandibulares de ratas macho fueron inyectadas con una solución de 0.5 por ciento de 9,10 dimetil 1,2-benzathracene (DMBA) diluida en acetona. Muestras de glándulas fueron analizadas mediante técnicas histológicas, bioquímicas, inmunocitoquímicas y por PCR a los 0, 7, 30 y 150 días postinyección. Para los estudios histopatológicos se utilizó la técnica de hematoxilina-eosina. Se determinó la concentración de proteínas totales por el método de Lowry y se realizaron corridas electroforéticas en gel de poliacrilamida SDS-PAGE al 12 por ciento para determinar el perfil proteico. Se realizó inmunomarcación para Bcl-2 con oro coloidal-plata y para p53 por streptavidina-biotina. Todos los animales tratados desarrollaron cambios similares a carcinomas a los 30 y 150 días. La concentracióan de proteínas totales aumentó significativamente (p<0,05) a los 7, 30 y 150 días en relación a los controles. En glándulas inducidas la inmunomarcación fue positiva para la proteína p53 en núcleos de células neoplásicas a los 30 y 150 días. En las mismas glándulas, la marcación citoplasmática de Bcl-2 fue positiva a los 7, 30 y 150 días(p=0,0015) y en relación a los controles (p<0,0001). No se observaron mutaciones de p53, mientras que se observó una mutación puntual, C A del gen bcl-2 a los 7, 30 y 150 días que generó un cambio de aminoácidos en la proteína (thre asn). Nuestros resultados sugieren que los cambios histopatológicos tempranos corresponden a modificaciones cuantitativas y cualitativas de las proteínas. Las modificaciones observadas a nivel histopatológico, bioquímico, inmunocitoquímico y genético en la carcinomgénesis experimental de glándula submandibular de rata podrían representar parámetros reproducibles de transformaciones malignas transferibles al ser humano, dada la alta homología de estos oncogenes entre rata, ratones...

Proliferación y apoptosis en epitelio lingual de ratones con tumores salivales inducidos por dimetilbenzantraceno (DMBA) y modulados por lípidos dietarios / Proliferation and apoptosis in tongue epithelium of mice bearing salivary tumors induced by dimetilbenzantraceno (DMBA) and modulated by dietary lipids

INTRODUCTION: According to the concept of field defects during the carcinogenesis process, excessive epithelial proliferation/apoptosis may exist in areas near tumors. Proliferation or apoptosis could be modified by dietary lipids. PURPOSE: The present study was designed to analyze proliferation and apoptosis in tongue epithelium of mice fed diets based on different lipids followed by induction of salivary tumors with DMBA. MATERIALS AND METHODS: Forty-five days after weaning, ten BALB/c mice were assigned to two diets: corn oil (CO) and fish oil (cod liver, FO). Two weeks later, DMBA was injected in the submandibular area. Animals were sacrificed at the 13th post-injection week. Samples of tongue were fixed in formalin-ethanol and immunohistochemically stained for proliferation (Ki-67) and apoptosis (Bax). By light microscopy, the number of nuclei positive for these markers were counted out of three-hundred total interphase cells both in dorsal and in ventral tongue surfaces. Results were analyzed through Analysis of Variance and t Test. RESULTS: Cell proliferation was greater in dorsal than in ventral tongue surfaces (p < 0.0001) with no diet difference. Apoptosis was significantly greater in mice fed FO than CO, particularly in tongue dorsal epithelia (p < 0.018). CONCLUSIONS: This study shows that FO diet induces higher levels of apoptosis in tongue epithelia suggesting a tissue defensive mechanism when exposed to a carcinogenic-tumoral agent.

Introducción: Según el concepto de cancerización de campo, existría alteración en la proliferación epitelial en áreas cercanas a tumores. Dicha proliferación podría ser modificada por lípidos dietarios. Objetivos: este estudio fue diseñado para analizar proliferación y apoptosis en epitelio lingual de ratones portadores de tumores salivalesinducidos por DMBA y alimentados con dietas a base de diferentes lípidos. Materiales y Métodos: Cuarenta y cinco días posteriores al destete, diez ratones BALB/c fueron asignados a dos dietas: maíz(M) y bacalao (B). Dos semanas después se inyectó DMBA en la zona submandibular. Los animales fueron sacrificados a ala 13º semana post-inyección. Muestras de lengua fueron fijadas en formal-etanl y procesadas inmunohistoquímicamente con marcadores de proliferación (Ki-67) y apoptosis. Mediante microscopia óptica, se efectuó un conteo de núcleos positivos a ambos marcadosres en un total de trecientas células en interfase, tanto en cara dorsal como ventral de lengua. Los resultados fueron analizados mediante Anális de Varianza y Test t. Resultados: La proliferación celular fue mayor en cara dorsal que en ventral (p> 0.001), sin diferencias por dieta. La apoptosis fue significativamentes mayor en ratones alimentados con B que M, en particular en cara dorsal (p<0.018). Conclusiones: Este estudio demuestra que la dieta B induce mayor apoptosis en ela epitelio lingua, sgiriendo un mecanismo defensivo de los tejidos ante el agente cancerígeno-tumoral.

Tumores provocados por metilcolantreno y lapachol. Seguimiento del desarrollo mediante citología / Tumors caused by methylcholanthrene and lapachol. Follow-up of desenvolviment by cytology

El presente trabajo fue realizado con el objetivo de estudiar el efecto por el lapachol (LAP) al ser administrado a rats en forma simultánea con un carcinógeno químico, el 20-merilcolantreno (MCA). Los animales fueron divididos en 4 lotes: A-Lote tratado con 80 mg de MCA (n=11 animales), B-Lote tratado con 80 mg de MCA+LAP 100 mg/Kg peso/día (n=15 animales), C-Lote tratado con LAP 100 mg/Kg peso día (n=12 animales), D-Lote control sin tratamiento (n=13 anisales). Los estudios citológicos así como la aplicación de técnicas citoquímicas permitieron conocer el diagnóstico de benegnidad o malignidad apenas producida la aparición del tumor. Estudios histopatológicos posteriores confiraaron la aparición el el 53 por ciento de los animales del lote B de tumores compatibles con adenocarcinomas pobremente diferenciados de glándula salival y en el 18.2 por ciento (2/11) de los animales del lote A de fibroadenomas de la glándula mamaria. Asimismo fue observada la presencia de uno o varios nódulos suprahepáticos en vencidad al ligamento suspensorio e histológicamente definidos como de hiperplasia nodular en el 33 por ciento (4/12) de los animales del lote C y en 13.3 por ciento (2/15) del B no produciéndose desarrollo de dichos nódulos en los lotes A y D. En el riñón fue observada dilatación quística de los túbulos en el 60 por ciento (9/15) y 83.3 por ciento (10/12) de los animales del lote B y C respectivamente. A partir del tumor primitivo de glándula salival fue desarrollada uma linea de tumores transplantables cuyo seguimiento fue realizado citológicamente. Se reafirma la importancia del diagnostico citológico e histopatológico para el estudio del efecto farmacológico de drogas que como el Lapachol son empleadas como antitumorales sin conocerse sus efectos nocivos.